Szukaj na tym blogu

czwartek, 3 marca 2016

Badania - niewiarygodnosc testow Elisa i Wb przy diagnozowaniu Boreliozy.

Linki do badan,ktore udowadniają NIEWIARYGODNOSC testow ELISA i Wb przy diagnostyce BORELIOZY

---------------------------------------------------------------------
The clinical diagnosis of Lyme borreliosis can be supported by various test methodologies; test kits are available from many manufacturers. Literature searches were carried out to identify studies that reported characteristics of the test kits. Of 50 searched studies, 18 were included where the tests were commercially available and samples were proven to be positive using serology testing, evidence of an erythema migrans rash, and/or culture. Additional requirements were a test specificity of ≥85% and publication in the last 20 years. The weighted mean sensitivity for all tests and for all samples was 59.5%. Individual study means varied from 30.6% to 86.2%. Sensitivity for each test technology varied from 62.4% for Western blot kits, and 62.3% for enzyme-linked immunosorbent assay tests, to 53.9% for synthetic C6 peptide ELISA tests and 53.7% when the two-tier methodology was used. Test sensitivity increased as dissemination of the pathogen affected different organs; however, the absence of data on the time from infection to serological testing and the lack of standard definitions for “early” and “late” disease prevented analysis of test sensitivity versus time of infection. The lack of standardization of the definitions of disease stage and the possibility of retrospective selection bias prevented clear evaluation of test sensitivity by “stage”. The sensitivity for samples classified as acute disease was 35.4%, with a corresponding sensitivity of 64.5% for samples from patients defined as convalescent. Regression analysis demonstrated an improvement of 4% in test sensitivity over the 20-year study period. The studies did not provide data to indicate the sensitivity of tests used in a clinical setting since the effect of recent use of antibiotics or steroids or other factors affecting antibody response was not factored in. The tests were developed for only specific Borrelia species; sensitivities for other species could not be calculated.

 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5872223/
--------------------------

 Neuroborelioza – wybrane aspekty patogenezy,diagnostyki i leczenia :Zajkowska J.M., Pancewicz S.A., Grygorczuk S., Kondrusik M.,Moniuszko A., Lakwa K.
Uniwersytet Medyczny w Białymstoku, Klinika Chorób Zakaźnych i Neuroinfekcji


Przedstawiono wybrane aspekty patogenezy wpływające na objawy neurologiczne boreliozy z Lyme, trudności w rozpoznaniu tej postaci choroby oraz aktualne opinie dotyczące leczenia. Omówiono zalecenia odnoszące się do leczenia neuroboreliozy w Europie,opracowane przez grupę ekspertów w ramach EUCALB, oraz rekomendacje Amerykańskiej Akademii Neurologii (AAN), uzupełnione wybranymi doniesieniami na temat długości stosowania terapii.
Pol. Merk. Lek., 2008, XXIV, 143, 453

PODSUMOWANIE

Ponieważ testy wykrywające przeciwciała są zawodne, a także mają pewną bezwładność (utrzymywanie się przeciwciał)w stosunku do zakażenia B.burgdorferi, ocena kliniczna jest najdokładniejszym narzędziem, jakim obecnie dysponujemy,pozwalającym podjąć decyzję o leczeniu oraz stwierdzić jego skuteczność. W leczeniu istotne są rekomendacje podane w standardach opracowanych dla Europy (EUCALB), jak również doświadczenie kliniczne lekarza.
http://www.researchgate.net/profile/Joanna_Zajkowska2/publication/266011866_Neuroborelioza__wybrane_aspekty_patogenezy_diagnostyki_i_leczenia/links/54aefda20cf2b48e8ed4d82c.pdf?inViewer=true&disableCoverPage=true&origin=publication_detail.  
---------------------------------------------------   
Wyniki fałszywie ujemne


Negatywny wynik badania serologicznego nie wyklucza choroby; szczególnie we wczesnej, zlokalizowanej postaci wynik większości testów jest ujemny (u ok. 50% badanych). Leczenie antybiotykiem we wczesnym etapie może spowodowaćsupresję odpowiedzi immunologicznej i żadne przeciwciała nie są wówczas wykrywane. Zatem negatywny wynik nie wyklucza boreliozy, ponieważ próbkę surowicy można pobrać, zanim pojawią się przeciwciała lub pojawią się one w ilości poniżej wykrywalności testu.


Wyniki fałszywie dodatnie
Reakcja krzyżowa może spowodować wynik fałszywie dodatni będący przyczyną nadrozpoznawalności boreliozy. W zdrowej populacji stwierdza się 5–8% wyników fałszywie dodatnich. Reakcja krzyżowa może nastąpić zarówno z niektórymi bakte-riami (Treponema pallidum, Treponema pertenue,inne borelie niepatogenne, leptospiry), jak i w czasie niektórych zakażeń wirusowych, wzbudzających poliklonalną produkcję przeciwciał, takich jak na przykład wirus Epsteina-Barr (EBV, Epstein-Barrvirus). Fałszywie dodatnia odpowiedź może się pojawić w chorobach autoimmunologicznych, schorzeniach wątroby (WZW C), a także może być spowodowana bakteriami B. burgdorferi, które nie wykazują cech patogennych


Problemem klinicznym jest odsetek wyników dodatnich u osób klinicznie zdrowych, przetrwanie przeciwciał po zakończeniu leczenia i ustąpieniu objawów chorobowych.


Oznaczanie przeciwciał potwierdzających zakażenie z zajęciem układu nerwowego jest trudne.

Stężenie przeciwciał w różnych przestrzeniach płynowych może być różne. Zależy to od kompartmentalizacji zjawisk immunologicznych, innych w miejscach immunologicznie uprzywilejowanych, takich jak płyn mózgowo-rdzeniowy. Zatem wykazanie syntezy przeciwciał w płynie mózgowo-rdzeniowym wymaga pomiaru przeciwciał w surowicy i płynie mózgowo-rdzeniowym oraz przeliczenia uwzględniającego różnice stężeń białek w obu przestrzeniach.

Wybrane aspekty patogenezy i diagnostyki neuroboreliozy.


Joanna M. Zajkowska, Sławomir A. Pancewicz

---------------------------------------------------------------------------------
Testy na boreliozę

Test Elisa jest testem bardzo zawodnym, wykrywalność tego badania to ok. 30%. Niestety z niezrozumiałych dla nas powodów ciągle się go zleca, a na jego wynikach opiera się diagnozę i leczenie.
Test Western Blot jest zdecydowanie bardziej czuły i daje dwa razy większą wykrywalność niż test Elisa. Wynik pozytywny oznacza boreliozę, wynik ujemny jej nie wyklucza!!! Ze względu na duży margines tzw. Boreliozy seronegatywnej!!! Czyli boreliozy, która jest niewidoczna dla układu odpornościowego, a co za tym idzie dającej negatywne wyniki badań serologicznych!!!
Badanie PCR i PCR Real time badanie bardzo drogie, ale o wysokiej skuteczności. Niestety i w tym przypadku bywają mylne wyniki, a wynika to z charakteru bakterii borreli. Testy PCR jak wspomniano wcześniej szukają DNA bakterii w krwi, niestety bakterie boreliozy bardzo szybko wnikają do innych tkanek (mięsni, stawów, nawet dziąseł) i tam się „ukrywają”. Jeśli bakteria wniknie z krwioobiegu do innych tkanek prawdopodobieństwo jej wykrycia zdecydowanie maleje, jest ona niewidoczna dla testu, co owocuje wynikiem fałszywie ujemnym
----------------------------------------------------------------------------------------

Lekarze standardowo zalecają wykonanie testu ELISA. Niestety test ten jest w boreliozie bardzo zawodny. Ta sama próbka krewi wysłana do kilku laboratoriów może dać całą gamę wyników, często wiele diametralnie różnych: ujemne, dodatnie, miana niskie lub wysokie. Jego wiarygodność pozostaje więc na poziomie 40 - 50 %. Mimo to test ELISA na boreliozę jest ciągle stosowany, gdyż jest tani.
http://boreliozainfo.pl/articles-diagnostyka-48.html
---------------------------------------------------------------------------
 Test Elisa (szuka globalnie przeciwciał)

Najtańszym, ale i najbardziej zawodnym testem jest powszechnie stosowany test Elisa.
W teście tym szukamy np. w surowicy krwi czy płynie mózgowo-rdzeniowym przeciwciał -ale, w przeciwieństwie do znacznie lepszego Western-Blot, identyfikujemy przeciwciała globalnie, czy w ogóle są jakiekolwiek przeciwciała. Przeciwciała bowiem, poza tym że dzielą się na wczesne IgM i późne IgG, mają tzw swoistość. Krętek, każda inna bakteria, zbudowana jest z fragmentów jemu swoistych, tzn występujących wyłącznie u krętka boreliozy, jak i nieswoistych, występujących i u innych podobnych jemu  bakterii czy nawet-niekiedy-wirusów. Podobnie tak jak ludzie-wszyscy mamy np. palce(element nieswoisty) ale różnimy się liniami papilarnymi(element swoisty, wykorzystywany np. w kryminalistyce). Do testu Elisa używamy całego krętka boreliozy-jeśli w badanej surowicy krwi są jakiekolwiek przeciwciała,swoiste lub nieswoiste, to one łączą się z krętkiem boreliozy-takie połączenia  zwane kompleksami krętek boreliozy-przeciwciała są oznaczane i wynik jest dodatni.
Niestety jeśli 100 osób jest chorych na boreliozę, to test Elisa wychodzi dodatnio w ok max. 30-40%. Ponadto test Elisa wychodzi dodatnio przy szeregu innych zakażeniach, np. w kile - czyli daje wiele reakcji krzyżowych;
Wśród naukowców i lekarzy trwają dyskusje na temat możliwości występowania w organizmie chorego z czynną boreliozą wyłącznie przeciwciał IgG. W immunologii, czyli dyscyplinie zajmującej się funkcjonowaniem układu odpornościowego, jest przyjęte, że o czynnym zakażeniu świadczy wzrost zazwyczaj co najmniej 4-krotny miana przeciwciał klasy IgM –  to one w pierwszym rzędzie oplatają, otaczają „siecią” komórkę bakteryjną tak, że nie może ona  atakować tkanek czy komórek naszego organizmu i może być strawiona przez komórki żerne-zabójcy. Przeciwciała klasy IgG powstają na wszelki wypadek. IgG długo utrzymują się we krwi  w okresie zdrowienia czyli rekonwalescencji, kiedy już nie ma czynnej infekcji czyli zakażenia bakteryjnego.
Z tego kanonu immunologii wyłamuje się borelioza - MOŻE BYĆ CZYNNA BORELIOZA WTEDY, KIEDY SA TYLKO PRZECIWCIAŁA KLASY IgG  W SUROWICY KRWI CZY NP. PŁYNIE MÓZGOWO-RDZENIOWYM. Podobnie jest np. w gruźlicy. Dlaczego tak jest, dokładnie nie wiadomo. Nie zawsze również obserwuje się gwałtowny, co najmniej 4-krotny wzrostu miana przeciwciał.  Innym specyficznym, wyjątkowym dla boreliozy zjawiskiem jest tzw. borelioza seronegatywna, czyli taka, w której przeciwciała nie występują w ogóle.
UWAGA-TEST ELISA A TAKŻE WESTERN-BLOT NIE WYKRYJĄ TAKIEJ POSTACI BORELIOZY, W KTÓREJ NIE DOCHODZI DO PRODUKCJI PRZECIWCIAŁ CZYLI TZW. SERONEGATYWNEJ BORELIOZY.
UWAGA 2-nie leczę na podstawie samego dodatniego testu Elisa, bez potwierdzenia boreliozy bardziej wiarygodnym badaniem
Krótkie podsumowanie testu Elisa:
1.  poszukujemy swoistych i nieswoistych przeciwciał(reakcje krzyżowe są bardzo często);
2.  do identyfikacji przeciwciał używamy całego krętka boreliozy;
3.  test testowi nierówny - są przypadki, że w jednym teście wychodzą przeciwciała np. IgM, a w drugim nie!;
4.  zdarza się postać aktywnej boreliozy bez przeciwciał;
5.  może być aktywna borelioza zarówno wtedy, kiedy są przeciwciała IgM jak i IgG!
6.  w zasadzie nie powinno się wykonywać tego najmniej dokładnego testu! Zdaniem ILADS test ten w ogóle nie powinien być stosowany!
http://www.kleszcz-choroby.pl/lista-artykulow/13-test-elisa
-----------------------------------------------------------------------------------
 
Test Elisa (szuka globalnie przeciwciał)
Najtańszym, ale i najbardziej zawodnym testem jest powszechnie stosowany test Elisa.W teście tym szukamy np. w surowicy krwi czy płynie mózgowo-rdzeniowym przeciwciał -ale, w przeciwieństwie do znacznie lepszego Western-Blot, identyfikujemy przeciwciała globalnie, czy w ogóle są jakiekolwiek przeciwciała. Przeciwciała bowiem, poza tym że dzielą się na wczesne IgM i późne IgG,mają tzw swoistość. Krętek, każda inna bakteria, zbudowana jest z fragmentów jemu swoistych, tzn występujących wyłącznie u krętka boreliozy, jak i nieswoistych, występujących i u innych podobnych jemu bakterii czy nawet-niekiedy-wirusów. Podobnie tak jak ludzie-wszyscy mamy np. palce(element nieswoisty) ale różnimy się liniami papilarnymi(element swoisty, wykorzystywany np. w kryminalistyce).
Do testu Elisa używamy całego krętka boreliozy-jeśli w badanej surowicy krwi są jakiekolwiek przeciwciała,swoiste lub nieswoiste, to one łączą się z krętkiem boreliozy-takie połączenia zwane kompleksami krętek boreliozy-przeciwciała są oznaczane i wynik jest dodatni.
Niestety jeś li 100 osób jest chorych na boreliozę , to test Elisa wychodzi dodatnio w ok max. 30-40%.
Ponadto test Elisa wychodzi dodatnio przy szeregu innych zakaż eniach, np. kiłą -czyli daje wiele reakcji krzyżowych;
Wśród naukowców i lekarzy trwają dyskusje na temat możliwości występowania w organizmie chorego z czynną boreliozą wyłącznie przeciwciał IgG. W immunologii, czyli dyscyplinie zajmującej się funkcjonowaniem układu odpornościowego, jest przyjęte, że o czynnym zakażeniu świadczy wzrost zazwyczaj co najmniej 4-krotny miana przeciwciał klasy IgM – to one w pierwszym rzędzie oplatają,otaczają „siecią” komórkę bakteryjną tak, że nie może ona atakować tkanek czy komórek naszego organizmu i może być strawiona przez komórki żerne-zabójcy. Przeciwciała klasy IgG powstają na wszelki wypadek. IgG długo utrzymują się we krwi w okresie zdrowienia czyli rekonwalescencji, kiedy już nie ma czynnej infekcji czyli zakażenia bakteryjnego.

Z tego kanonu immunologii wyłamuje się
borelioza-MOŻE BYĆ CZYNNA BORELIOZA WTEDY, KIEDY SA TYLKO PRZECIWCIAŁA KLASY
IgG W SUROWICY KRWI CZY NP. PŁYNIE MÓZGOWO-RDZENIOWYM. Podobnie jest np. w gruźlicy.
Dlaczego tak jest, dokładnie nie wiadomo. Nie zawsze również obserwuje się gwałtowny, co najmniej 4-krotny wzrostu miana przeciwciał. Innym specyficznym, wyjątkowym dla boreliozy zjawiskiem jest tzw. borelioza seronegatywna, czyli taka, w której przeciwciała nie występują w ogóle.
UWAGA-TEST ELISA A TAKŻE WESTERN-BLOT NIE WYKRYJĄ TAKIEJ POSTACI BORELIOZY, W KTÓREJ NIE DOCHODZI DO PRODUKCJI PRZECIWCIAŁ CZYLI TZW. SERONEGATYWNEJ BORELIOZY.
Krótkie podsumowanie testu Elisa:
1. poszukujemy swoistych i nieswoistych przeciwciał(reakcje krzyżowe są bardzo często);
2. do identyfikacji przeciwciał używamy całego krętka boreliozy;
3. test testowi nierówny -są przypadki, że w jednym teście wychodzą przeciwciała np. IgM, a w drugim nie!;
4. zdarza się postać aktywnej boreliozy bez przeciwciał;
5. może być aktywna borelioza zarówno wtedy, kiedy są przeciwciała IgM jak i IgG!
6. w zasadzie nie powinno się wykonywać tego najmniej dokładnego testu! Zdaniem ILADS test ten w ogóle nie powinien być stosowany!
Western-Blot(test szukający swoistych przeciwciał)
Bardzo podobnym do testu Elisa jest test zwany Western-Blot. Idea jego jest bardzo podobna do testu Elisa- szukamy w danym materiale przeciwciał. Ale do tego testu używamy pojedynczych fragmentów „zmielonego i rozkawałkowanego” krętka boreliozy. Fragmenty te mają oznaczenie np. p41, OspC, Vise i inne i są często określane jako prążki. Jeśli utworzą się kompleksy fragment krętka boreliozy-przeciwciało, wynik zapisuje się jako dodatni w danym prążku-fragmencie. Dąży się do tego, by używać jak najbardziej swoistych fragmentów-w praktyce nie jest możliwe zastosowanie takiego fragmentu krętka boreliozy, który występuję tylko u niego! . I tak np. fragment p41 występuje u krętka boreliozy i w zakażeniu bakterią Helicobacter pylorii wywołujacej chorobę wrzodową.I tu pojawia się problem interpretacji testu Western-Blot.
Test Western-Blot wychodzi dodatnio w 50-80% i jest testem dość swoistym-powinien być wykonywany w pierwszej kolejnoś ci, zawsze w obu klasach.
Interpretacja testu Western-Blot wg ILADS:
Wynik testu Western-Blot może być różnie interpretowany. Jeśli otrzymamy wynik Western-Blot dodatni w jednym prążku np. p41, to najczęściej spotkamy się z opisem: wynik ujemny lub graniczny. Bo prążek p41 to fragment występujący nie tylko u krętka boreliozy , ale i u kilku innych bakterii np.
Helicobacter pylorii. W praktyce nie odkryto takiego fragmentu krętka boreliozy, który występowałby tylko u niego czyli byłby w 100% swoisty. Co więcej liczne badania pokazują, że im bardziej swoisty prążek , tym wychodzi rzadziej w teście Western-Blot. ILADS stoi na stanowisku, że nie można interpretować testu Western-blot bez odniesienia do objawów klinicznych! Jeśli ktoś ma dodatni tylko prążek p41 i objawy wskazujące na chorobę wrzodową-należy z dużym prawdopodobieństwem rozpoznać chorobę wrzodową, natomiast przy rozsianych, wielonarządowych i napadowych objawach podejrzewać z dużym prawdopodobieństwem boreliozę. To tak samo, jakby zrobić poziom cukru we krwi i otrzymać wynik 160mg%-jeśli pomiar wykonywany był na czczo, rozpoznaje się cukrzycę, a ten sam wynik uznaje się za prawidłowy, jeśli pomiar był wykonany po posiłku. Western-blot podobnie jak test
Elisa nie wykryje boreliozy bez przeciwciał czyli seronegatywnej. Aby wykluczyć boreliozę, test ten powinien być wykonywany co najmniej 5-o krotnie, przed jak i w trakcie testowej antybiotykoterapii.
Zdarza się, że początkowy ujemny test Western-blot staje się dodatni po włączeniu antybiotykoterapii, w tym koniecznie na rozpad cyst!
Krótkie podsumowanie testu Western-blot:
1. w badanym materiale , surowicy czy płynie mózgowo-rdzeniowym, są poszukiwane przeciwciała przeciwko-krętkowe;
2. używamy w miarę swoistych fragmentów krętków(by wyeliminować reakcje krzyżowe);
3. dodatni wynik testu świadczy o czynnej boreliozie, choć zdania są podzielone czy i w klasie IgG;
4. w badanej próbce krwi może się zdarzyć, że akurat nie ma oznaczalnych testem W-B przeciwciał– warto więc badanie W-B powtarzać kilkukrotnie i stosować droższe testy zawierające dużo swoistych, znakowanych prążków. Lepiej go wykonać w placówkach naukowych, choć drożej!Test Western-Blot powinno się wykonywać przed jak i-w przypadku negatywnego wyniku-w trakcie już rozpoczętej antybiotykoterapii i to co najmniej 5-o krotnie!;
5. zawsze należy wykonywać Western-Blot w obu klasach;
6. Interpretacja testu Western-Blot zawsze powinna być odniesiona do objawów klinicznych wg ILADS!;
7. test Western-Blot nie wykrywa, podobnie jak test Elisa, seronegatywnej czyli bez przeciwciał postaci boreliozy!
Seronegatywna-bez przeciwciał- borelioza:
-przeciwciała pojawiają się z pewnym opóźnieniem od momentu pokąsania przez zarażonego kleszcza. Warto robić testu Elisa czy Western-blot nie wcześniej niż 6 tygodni od momentu kontaktu z zakażonym kleszczem;
-we krwi czy płynie mózgowo-rdzeniowym mogą być same kompleksy krętek boreliozy-przeciwciała.
Natomiast test Elisa czy Western-blot wychodzi dodatnio tylko wtedy, kiedy w badanym materiale są same, wolne przeciwciała-testy te nie wykrywają kompleksów. Są badania pokazujące , że np. w płynie mózgowo-rdzeniowym aż w 30-40% w neuroboreliozie występują tylko kompleksy immunologiczne!;
-krętek boreliozy może być w formie typowej bakterii( tzn każda bakteria otoczona jest ścianą komórkową)-jeśli w takiej formie, która wg niektórych jest uważana za formę inwazyjną,zostanie pochłonięty przez makrofag, wtedy powstaną wolne przeciwciała. Jednak w niekorzystnych warunkach krętek boreliozy z typowej formy inwazyjnej bakterii ze ścianą komórkową przemienia się w formę prowirusa(bez ściany komórkowej-a wirusy tym różnia się od bakterii, że m in nie mają ściany komórkowej), o zwolnionym metaboliźmie, „uśpiony” czyli nieinwazyjną, zwaną także niekiedy formą L.
Taka forma L prowirusa szybko otacza się otoczką- pęcherzykiem , z ang. bleps, zaś krętki w formie prowirusa w otoczce-pęcherzyku szybko łączą się ,zlewając się owymi pęcherzykami, tworząc cysty.
Do cysty nie penetrują makrofagi-czyli nasz układ immunologiczny może nie rozpoznać zakażenia krętkami w formie nieinwazyjnej czyli „uśpionego” prowirusa w cystach. Wiele jest obserwacji lekarzy ILADS, że im dłużej trwa nierozpoznana borelioza, tym częściej jest seronegatywna czyli bez przeciwciał,bo krętki są „uśpione” w cystach;
-zdarza się, że krętek w formie prowirusa nie wytworzy pęcherzyka i cysty, ale zostaje w takiej formie pochłonięty przez makrofag. Makrofag wtedy uważa, że jest zakażenie wirusem , a nie bakterią i powoduje powstanie pobudzonych limfocytów T, a nie przeciwciał. Pobudzone limfocyty T skierowane na krętka boreliozy w formie prowirusa wykrywa test zwany LTTborelioza
-przeciwciała produkują komórki zwane limfocytami B. Wykazano, że krętek boreliozy może niszczyć te komórki i dlatego może być borelioza bez przeciwciał czyli seronegatywna;
-przeciwciała nie powstaną, jeśli ktoś bierze leki immunosupresyjne najczęściej sterydy.
Dr.Piotr Kurkiewicz
-------------------------------------------------------------------------------

Diagnostyka boreliozy jest trudna, ponieważ:
  • bakterie Borrelia wypracowały unikalne mechanizmy interakcji z gospodarzem,
    w wyniku których mogą być nierozpoznawalne przez układ immunologiczny żywiciela (zmienność antygenowa),
  • żywe bakterie Borrelia mogą przebywać wewnątrz komórek i w miejscach niedostępnych dla komórek układu immunologicznego (komórki śródbłonka i fibroblasty, ośrodkowy układ nerwowy, aparat ruchu i inne),
  • wiele antygenów krętków Borrelia występuje w innych organizmach (wirusach, bakteriach), stąd liczne reakcje krzyżowe i fałszywie dodatnie wyniki badania przeciwciał przy braku zakażenia,
  • po kontakcie z kleszczem zakażonym Borrelią organizm produkuje przeciwciała, które mogą utrzymywać się przez wiele lat, pomimo braku aktywnej choroby,
  • na podstawie samego badania przeciwciał nie można odróżnić aktywnego zakażenia od zakażenia przebytego w przeszłości,
  • nie można oceniać skuteczności leczenia na podstawie badania przeciwciał, ponieważ przeciwciała w obu klasach mogą utrzymywać się nawet wiele lat po wyleczeniu,
  • opisywana jest lokalna produkcja przeciwciał, np. tylko w płynie maziowym (w zapaleniu stawów) lub płynie mózgowo-rdzeniowym (w neuroboreliozie),
  • u pacjentów z zaburzeniami odporności nie są produkowane przeciwciała,
  • pojawiają się trudności w wykrywaniu przeciwciał, występujących w postaci kompleksów immunologicznych (z antygenami bakteryjnymi).


https://synevo.pl/biuro-prasowe/borelioza-2016-fakty-i-mity-14032016/borelioza-z-lyme-choroba-wciaz-tajemnicza/

------------------------------------------------------------------------------------------
DIAGNOSTYKA :
Diagnostyka boreliozy nie jest łatwa, poniewaz nie dysponujemy jednoznacznym testem (co wynika ze złozonej budowy i zmienności antygenowej bakterii) oraz z powodu trudności interpretacyjnych.

Niestety,zadna z dostępnych metod diagnostyki laboratoryjnej boreliozy nic pozwala na odróznienie aktywnego zakazenia od śladu po przebytym zakazeniu.

Wyjątek stanowi hodowla, która jako jedyna dowodzi obecności zywych bakterii w badanym materiale.

W diagnostyce serologicznej boreliozy nalezy zwrócić szczególną uwagę na to kiedy i jaki materiał pobierany jest do badania oraz czy diagnostyka prowadzona jest zgodnie z obowiązującymi standardami postępowania. Wyniki nalezy interpretować zawsze uwzględniając stan kliniczny pacjenta.
 
O ewentualnym powtarzaniu badań serologicznych powinien decydować lekarz po przeanalizowaniu dotychczasowych wyników i postępu choroby.
W przypadku utrzymywania się wyraźnych objawów klinicznych przy stałej seronegatywności należy przeprowadzić narządową diagnostykę róznicową w kierunku obecności innych schorzeń o podobnym obrazie klinicznym jak stwierdzany w boreliozie
------------------------------------------------------------------------

Z powyższych danych wynika iż technika ELISA może„ przepuszczać” wyniki dodatnie. Dobrą praktyką byłoby potwierdzanie nie tylko wątpliwych i dodatnich ale również ujemnych wyników testu przesiewowego w uzasadnionych przypadkach, np.: w odniesieniu do pacjentów z klinicznym podejrzeniem boreliozy z Lyme [2, 52]. Pozostaje jednak pytanie o czułość testu przesiewowego, czas w jakim pobrano próbkę do badań oraz o refundację i tak już wysokich kosztów badań serologicznych z zakresu diagnostyki boreliozy z Lyme. We wczesnych stadiach boreliozy, kiedy miano przeciwciał jest niskie testy serologiczne mogą być fałszywie ujemne z powodu niskiej czułości.


Odpowiedni czas pobrania materiału do badań serologicznych (3–4 tygodnie od momentu zakażenia) może ograniczyć generowanie wyników fałszywie ujemnych[18, 20, 33, 34, 50].


Złożona budowa krętków oraz ich zmienność antygenowa wpływa na konieczność konstruowania i standaryzacji odpowiednio czułych i swoistych testów laboratoryjnych, które wciąż ulegają technologicznym modyfikacjom [11, 25, 27, 30]. Stosowanie dowolnej kombinacji testów ELISA – WB/IB dostarczanych przez różnych producentów oraz brak ujednoliconych kryteriów interpretacji stwarza trudności diagnostyczne i niemożność porównywania wyników między laboratoriami [19, 31].


Wykorzystując gatunkowo-swoiste antygeny istnieją wciąż ograniczone możliwości w określaniu specyfiki zakażenia. Diagnostyka z wyboru prowadzona w oparciu o najnowsze testy nie eliminuje całkowicie reakcji krzyżowych. Nadal nie można jednoznacznie wykluczyć zjawiska homologii antygenów różnych genogatunków jak również nie można rozstrzygnąć problemu jedno/wielogenogatunkowej etiologii boreliozy z Lyme [11, 24].


Serologiczna diagnostyka boreliozy w praktyce laboratoryjnej nie jest łatwa, wymaga wiedzy specjalistycznej, wyboru i stosowania wiarygodnych testów, umiejętności interpretacji oraz badań porównawczych nad immunoreaktyw nością surowic w oparciu o najnowsze testy dostępne na rynku.


Bardzo ważna jest wiedza dotycząca pobrania materiału na badanie oraz prowadzenie diagnostyki zgodnie z wytycznymi PTEiLChZ [18–20, 50]. W polskich laboratoriów praktykuje się jeszcze jednostopniowy schemat badania, co potwierdzają dane NIZP-PZH [40]. Diagnostyka boreliozy powinna być prowadzona w laboratoriach, gdzie specjaliści rozumieją ograniczenia poszczególnych testów komercyjnych dostępnych na rynku [1, 13], jak również współpracują z klinicystą w zakresie omówienia wyników i wyjaśniania wątpliwości.

Witecka-Knysz, Małgorzata Klimczak, Karol Lakwa, Joanna śajkowska1, Sławomir Pancewiczl, Maciej Kondrusikl, Sambor Grzegorczuk1, Renata Świerzbińskal, Teresa Hermanowska-Szpakowicz1

1 Klinika Chorób Zakaźnych i Neuroinfekcji Akademii Medycznej w Białymstoku
2 Wojewódzki Zespół Specjalistycznej Opieki Zdrowotnej we Wrocławiu

http://www.pm.microbiology.pl/web/archiwum/vol5432015283.pdf.


----------------------------------------------------------------------------------
-----------------------------------------------------------------------------------------
http://lymemd.blogspot.com/2013/11/lies-about-western-blot.html

Lies about western blot blood test
--------------------------------------------------------------------------------
CDC two-tier blood test misses over half Lyme positive patients
 ---------------------------------------------------------------------------------------

Borelioza - choroba kontrowersyjna. Zarys problemu. 09.01.2009

autor: Sławomir Czernecki

Najczęściej stosowanym testem w Polsce jest ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Test ten sprawdza się w diagnozowaniu wielu różnych chorób, jednak w przypadku boreliozy stosowanie go jest wielkim nieporozumieniem. Jak wykazują niezależnie prowadzone badania, prawie połowa wyników testu ELISA może być fałszywie dodatnia lub fałszywie ujemna. [9,10,11,12]
Jednakże czynnik ekonomiczny (to stosunkowo tani test w zestawieniu z innymi), dostępność, przyzwyczajenie lekarzy i brak dostatecznej informacji o precyzji tego testu w diagnostyce boreliozy oraz inne czynniki powodują, że ELISA jest nadużywana.
Schemat diagnostyczny opisany w wytycznych leczenia boreliozy w Polsce zaleca, w przypadku dodatniego lub wątpliwego wyniku testu ELISA, wykonanie innego z testów serologicznych – Western-Blot jako potwierdzenie zakażenia.

http://hylostet.pl/igm/article/16/
--------------------------
..Dr. Burgdorfer says: “The controversy in the Lyme disease research is a shameful affair and I say this because the whole thing is politically tainted. Money goes to the same people who have for the last thirty years produced the same thing. Nothing”. [90]. The Borrelia bacteria has at least three different morphological forms. (1) A spirochete form [91]. (2) A round body form that is also known as cyst form [92]. (3) A biofilm form [93]. The Borrelia bacteria evade the immune system by for example changing morphology [94] and by changing its outer surface proteins (Osp) also known as antigens [95,96,97,98]. When the bacteria change its antigens all the time, the specific antibodies that are produced by the immune system to try to eradicate the infection becomes useless. The DNA structure that is believed to be responsible for the bacteria’s antigenic variation ability is called ,,
,,A European study [121] estimates the sensitivity of the Lyme disease test to 44%. Such number was found by analyzing the performance of eight different Lyme disease tests. 89 different blood samples were tested for each test manufacturer. The sample also included healthy controls. Another study [122] that conducted a meta-analysis of the American scientific literature (eight scientific articles) regarding the performance of the Lyme disease test estimates the sensitivity of the Lyme disease test to 46% and the specificity to 99%. Because the blood tests that are used today by government health agencies to detect the human body’s production of antibodies against the Borrelia bacteria’s antigens are so insensitive Lyme disease, today must be defined as a clinical diagnosis as correctly advocated by ILADS. If a patient has had a blood test that suggests a Lyme disease infection that is fine, but a positive blood test should not be a requirement for a diagnosis. A person that suspect a Lyme disease infection is today, unfortunately, better of tossing a coin and diagnosing themselves because the blood tests for Lyme disease today will miss most infections. Specific antibodies often cannot be found in patients with Lyme disease because of the bacteria ability to shift its antigens.

 Testing cerebrospinal fluid instead of blood will not improve test sensitivity because the bacteria can still shift its antigens in cerebrospinal fluid which means that the probability of detecting specific antibodies in cerebrospinal fluid is not larger than in blood. Moreover, cerebrospinal fluid causes the bacteria to change its morphology from a spirochete form to a cyst from [123]. If you only diagnose Lyme disease in patients that have specific antibodies in their blood or cerebrospinal fluid, you will miss most cases. To better understand Lyme disease testing let’s look at the confusion matrix [124]. All calculations can be found in the macro-enabled excel file “Lyme disease model.xlsm”. We assume in Table 1 that the number of people in the disease and control groups are known and equal. In real life, however, we do not know the number of people in the disease and control group. We can only observe the total number of people that tested positive in both groups.,,

 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5872223/
-------------------------------
Abstract
Genes for the outer-surface protein C (OspC) from three north European human isolates of Borrelia burgdorferi sensu stricto, B. afzelii and B. garinii were cloned and sequenced. Polyhistidine-tagged recombinant OspC (rOspC) proteins were produced in Escherichia coli and used, after biotinylation, as antigens on streptavidin-coated plates in enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). In IgM ELISA, 30% (5/17) and 35% (6/17) of patients with erythema migrans (EM) in the acute or convalescent phase, respectively, reacted with one to three rOspCs. Of the patients, 53% (8/15) with neuroborreliosis (NB) and 53% (8/15) with Lyme arthritis (LA) had IgM antibodies to OspC. The immunoreactivity was stronger against rOspC from B. afzelii and B. garinii than against rOspC from B. burgdorferi sensu stricto. In early Lyme borreliosis (LB), rOspC and flagella performed equally well in detecting IgM antibodies. Cross-reactive antibodies to rOspC were observed in serum samples from patients with rheumatoid factor positivity and with syphilis or Epstein-Barr virus (EBV) infection. In IgM ELISA, thiocyanate in the serum dilution buffer reduced EBV-associated non-specific positive reactions. Of the patient sera examined in IgG ELISA, 30% (5/17) with EM in the acute phase, 35% (6/17) with EM in the convalescent phase, 33% (5/15) with NB and 60% (9/15) with LA were positive. Because of the heterogeneity of OspC, a polyvalent antigen with several OspC variants from at least B. afzelii and B. garinii is needed to improve the sensitivity of OspC ELISA in the serodiagnosis of LB in Europe.,,

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12358063
-------------------------------
Liczba wyników testu ELISA IgM- i / lub IgG-dodatnich w grupie pacjentów podejrzanych o zakażenie Borrelia wynosiła od 34 do 59%. Odsetek wyników dodatnich w kontrolach reaktywności krzyżowej wynosił od 0 do 38%

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21271270
------------------------
,,Istniejące dwuwarstwowe testy serologiczne dają niską wrażliwość (29% -40%) na wczesne zakażenie. Brak dokładnego testu laboratoryjnego na wczesną boreliozę przyczynia się do nieporozumień na temat diagnozy i leczenia oraz podkreśla potrzebę nowych podejść diagnostycznych,,

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25761869
-------------------------



Autor: o
Etykiety: , ,

Brak komentarzy:

Prześlij komentarz

Subskrybuj: Komentarze do posta (Atom)